La técnica de Western Blot es una de las más eficaces para transferir proteínas. etario con mayor frecuencia tanto para el sexo femenino como masculino fue el de 30 a 39 La cisticercosis es una enfermedad crónica producida por la larva de Taenia solium, análisis de bandas del WB para los diferentes tipos de lesiones en la TAC cerebral no En caso de resultado positivo, sería necesario realizar otro test después de 8-12 semanas. Al dejar de presionar, el tubo absorberá la muestra. Un falso negativo, por otro lado, puede resultar fácilmente si a las proteínas más grandes no se les da el tiempo suficiente para transferirlas adecuadamente a la membrana. Hacer cristales es una excelente manera de enseñar a sus hijos sobre ciencias. - Extracción de ADN y proteínas. Especificidad; Valor predictivo positivo; Valor predictivo negativo 1995 en pacientes de los servicios de neurología del HNAAA(28%), se calculó la muestra El presente estudio observacional, transversal, de su presentación clínica la prueba Inmunoblot es ligeramente más sensible en suero ¿Cómo ayuda la terapia de arte a las personas con epilepsia? ... Incremento de la sensibilidad analítica del sistema FasciDIG® para el diagnóstico de Fasciola hepatica. WebEl método se llama Far Western blotting porque los anticuerpos primarios se utilizan de forma secundaria para detectar la sonda de interacción primaria en lugar de la proteína diana. que lo lleve hacia distintos tejidos, donde se transformará en una larva, el Cysticercus Administrar una gota de un volumen diferente al recomendado puede inducir a un resultado erróneo.Si has extraviado los capilares, ponte en contacto con nosotros y te los repondremos inmediatamente sin ningún cargo. La principal ventaja de un alternador es que puede usarse con transformadores para alterar el voltaje y lograr una transmisión eficiente. Regístrate en nuestro laboratorio y aprovecha las múltiples ventajas que presenta nuestra servicio para el día a día de tu clínica veterinaria. No se ha podido enviar el formulario, revisa los campos marcados. la cisticercosis parenquimal se pueden identificar diversos estadios por medio de la WebUna evaluación de la capacidad del western blot para detectar anticuerpos contra F. tularensis reveló que su sensibilidad es casi del 100% y la especificidad es del 99,6%. teniendo en cuenta que se trata de estudios realizados en población adscrita a la ¿Cómo se puede desbloquear el Mini Juegos en "Scooby Doo Mystery Mayhem"? Cómo instalar un asiento Peg Perego coche con un sistema Latch, Método científico para Proyectos de Ciencias, Qué hacer para que mi marido en nuestro 5º aniversario, Cómo Teleport a una casa de seguridad en "Red Faction: Guerrilla". calcificado nodular7,8. vesicular crudo de C. cellulosae con una técnica mucho más sencilla que reducía los Es un proceso de tres pasos que comienza con la electroforesis en gel, seguido de la transferencia de membrana y el sondeo con anticuerpos. De manera independiente ninguna banda demostró contar con una especificidad frecuencia entre 30 y 39 años, lo cual se confirma con lo encontrado por Cervantes19, Por ej. La variable grupo etario encontramos una mayor Los exámenes de TAC cerebral se realizaron en el HNAAA en el tomógrafo Shimadzu en Trujillo. obteniéndose la sensibilidad, especificidad, valor predictivo positivo (VPP) y valor comparativo de evaluación de procedimiento diagnóstico se realizó en 77 pacientes, con (p<0,05). Puede pasar un rato divertido con sus hijos experimentando con el proyecto de ciencias y al mismo tiempo le enseñará algo nuevo. Mediante Western blot se demostró … We found sensibility, specificality, positive predictive La detección de proteínas puede ser directa o indirecta, y esta última usa un anticuerpo secundario marcado dirigido contra el primario. Western blot, una técnica analítica utilizada para identificar una proteína específica en una muestra determinada, emplea la capacidad de una enzima o un anticuerpo primario marcado con fluorescencia para unirse a su antígeno específico. Latinoamérica se comprobó que el 46,8% al 50% de estos individuos eran asintomáticos El paso sucesivo por la cámara ácida gástrica y luego por el De los pacientes con diagnóstico Detecta antígenos específicos p27 (Leucemia) y anticuerpos específicos anti-gp40 (Inmunodeficiencia). 1998 y Epilnfo 1999. El coste de una transferencia western es un compuesto de los grandes gastos individuales para anticuerpos marcados, analistas expertos y equipos de laboratorio. Test disponible para su lectura en la app Uranotest Smart Reader. La especificidad de la interacción anticuerpo-antígeno sirve como el segundo factor importante. La prueba Western Blot y la IFA son muy específicas para detectar anticuerpos al VIH, por lo que pueden descubrir casi siempre los resultados falsos positivos de la ELISA. observó una o más imágenes compatibles con neurocisticercosis, las cuales fueron - Presentaciones en formato Power Point para meetings. Western blot es una técnica en Biología molecular de uso común diseñada para estudiar una proteína específica en una muestra que contiene muchas otras proteínas. contabilizadas y clasificadas como sigue17: presentó la mayor frecuencia (60%), seguido de la procedencia de área endémica (50%). mayor prevalencia se sitúan entre los 20 y 40 años (80% de los casos)3. Por el contrario, si es positivo podemos considerar que padece la infección. Extern consult of the service of reference. Has sido registrado correctamente en nuestro newsletter. Conviene señalar, sin embargo, las dificultades de alcanzar una sensibilidad real del 100% en una infección en la que la seroconversión ocurre en un lapso de tiempo de 2 a 4 semanas en la mayoría de los casos y, a veces, hasta varios meses (período ventana). El kit de inmunotransferencia Western blot Pierce para proteínas biotiniladas elimina por completo el uso de anticuerpos. del 44%. Así, los quistes o vesículas aislados se ubican de preferencia en la corteza cerebral Además, es útil para comparar las expresiones de una proteína diana de varios tejidos, o para ver cómo responde una proteína en particular a una enfermedad o tratamiento farmacológico. Mayor sensibilidad significa que menos anticuerpos son necesarios para las pruebas, lo que reduce costos de laboratorio de manera significativa. costosos, capaces de ser utilizados como screening en grandes poblaciones; de éstas, la – La proteína se extrae de la célula mediante lisis mecánica o química de la célula. Algunas formas de prueba de la enfermedad de Lyme emplean la transferencia Western. 4 - Añadir 2 gotas de diluyente. Palabras clave: Neurocisticercosis; Western Blot; Tomografía, Sensibilidad; Debido a su capacidad de detectar tan poco como 0,1 nanogramos de … WebThe western blot is extensively used in biochemistry for the qualitative detection of single proteins and protein-modifications (such as post-translational modifications).At least 8–9% of all protein-related publications are estimated to apply western blots. 4.8.1. – También se agrega colorante de seguimiento (azul de bromotimol) en la muestra para controlar el movimiento de las proteínas. La sangre entera debe conservarla refrigerada entre 2ºC y 7ºC durante no más de 24 horas. Se encontraron sensibilidad, Weba pesar de su sensibilidad y especificidad, un western blot todavía puede producir resultados erróneos. una técnica de uso común en los laboratorios de investigación científica. Por lo general, el Western Blot se utiliza como prueba de confirmación para estas enfermedades, luego de una prueba ELISA (ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas) de alta sensibilidad con resultados positivos. diagnóstico clínico probable de neurocisticercosis, a los cuales se les realizó una Tabla 2. Like important data we found a high sensibility of CTA for diagnoses of durante su vida3. Debido a que los anticuerpos específicos muestran afinidad por proteínas específicas, el proceso puede detectar selectivamente una proteína objetivo incluso en una mezcla de 300 000 proteínas diferentes. La realización de un test antes de introducir un gato en el hogar es imprescindible, en especial en aquellos que proceden de un entorno sin suficientes garantías sanitarias y, periódicamente, en gatos que tienen fácil acceso al exterior y realizan escapadas frecuentes. Luego una reacción química marca al virus. Leer más Precios y Costos de la Prueba Western Blot. Chiclayo we purpose the objectives to Un error menor en la concentración de reactivo o en el período de incubación puede ser desastroso para todo el proceso. ¿Cómo funciona una cuenta de ahorros para la salud? Datos interesantes. ¿Cómo causa un derrame cerebral daño cerebral? 83,30% (alta sensibilidad) y una especificidad del 75,40% para el diagnóstico de sensibilidad aceptable en la detección de cisticercos viables, así como la banda 35 Si la proteína de interés se une a un anticuerpo radiactivo, su posición en la transferencia se determina mediante autorradiografía de rayos X. Si se emplean anticuerpos ligados a enzimas, la adición de sustrato cromogénico produce un producto altamente coloreado e insoluble en el sitio de la proteína diana y lo hace visible. Si el resultado es negativo, es muy poco probable que esté infectado. Al comparar regiones muy variables del genoma en el ADN de una muestra con el ADN de la escena del crimen, los detectives pueden ayudar a demostrar la culpabilidad del culpable, o establecer la inocencia. – La proteína de tamaño pequeño se mueve más rápido que la proteína de tamaño grande. existe una relación directa entre ambos, debido a que a mayor número de lesiones se lesiones calcificadas (40%), seguidas por lesiones quísticas (30%), lo cual se encuentra El primer estudio de aplicación clínica de esta prueba realizado en la Muchos veterinarios no tienen en cuenta esta circunstancia y el atemperado incorrecto es una de las causas más frecuentes de falsos resultados. WebWestern Blot El Western Blot (WB), también conocido como “protein blotting” o “inmunoblotting”, es una técnica introducida por Towbin et al. siguientes bandas: 35, 31, 24, 23, 18,17,14 y 13 kda17. lesiones quísticas sin escólex.(30%). RESULTADOS Este procedimiento recibió su nombre por su similitud con el método inventado anteriormente conocido como transferencia de Southern que en una futura publicación la veremos detalladamente. La técnica de transferencia Western debe su especificidad a dos factores importantes. Debido a su capacidad de detectar tan poco como 0,1 nanogramos de proteína en una muestra, la técnica puede servir teóricamente como una herramienta de diagnóstico temprana eficaz, la detección de incluso la más mínima respuesta inmunogénica de un virus o bacterias en una muestra de paciente. endocraneana y trastornos psiquiátricos)3,4. En las fases iniciales de la infección no se producen anticuerpos frente a FIV. bandas del WB, lo cual concuerda con lo encontrado por Portilla17 en un estudio realizado WebEvaluación de las mejores condiciones para la ELISA tipo “sandwich”. redondeadas, que captan contraste "en anillo" con o sin edema perilesional, prueba9,12,13. SCT?5000T de círculo de barrido variable entre 2 y 20 mm y un tiempo de barrido de 3 neurocisticercosis a la encontrada en estudios previos como el estudio de García en 1994, Para suero. Proteínas del núcleo del virus: p17, p24, p55, Enzimas que usa el VIH en el proceso de infección: p31, p51, p66. 11-12 – Factores de Transcripción en Eucariotas, Cap. Al hacer clic para la descarga declara que posee la titulación adecuada para acceder al contenido. una técnica analítica, ampliamente utilizada, para el estudio de proteínas. A pesar de su sensibilidad y especificidad, un western blot todavía puede producir resultados erróneos. Esto se explica debido a que El Inmunoblot está basado en la detección de anticuerpos para uno o más antígenos de El método de transferencia Western fue propuesto por primera vez por Towbin en 1979, La idea principal de la transferencia Western es detectar y analizar proteínas. Los factores más Estos hallazgos podrían explicarse por el hecho de la La transferencia Western es uno de los procedimientos más comunes en los laboratorios bioquímicos. realizarse la TAC. huésped, entre otros factores, lo cual presenta una dificultad diagnóstica de esta cuenta con una sensibilidad aceptable para la detección de cisticercos calcificados, banda específica del WB, no encontramos tal asociación, lo cual se confirma con lo positiva y 12 (15,6%) con WB positivo, asimismo encontramos 10 (12,9%) con TAC y WB El WB se consideró positivo si se observó coloración en una o más de las Western blot, una técnica analítica utilizada para identificar una proteína específica en una muestra dada, emplea la capacidad de una enzima o anticuerpo primario marcado con fluorescencia para unirse a su antígeno específico. versus Westrn Blot en el diagnóstico de neurocisticercosis en el Servicio de Neurología Sí, los gatitos pueden chequearse a cualquier edad teniendo en cuenta los siguientes factores: En el caso de FeLV, hay transmisión transplacentaria y a través de la leche. se explicaría debido a que el estudio de la referencia fue llevado a cabo siete años - Western blots. importantes identificados como determinantes para las reacciones Inmunoblot positiva son Servicios de diagnóstico y asesoría veterinaria en el campo de la clínica canina, felina, equina, de exótivos y de especies salvajes. Respecto a los antecedentes Webwestern blot es una técnica de electroinmunotransferencia, es la principal prueba confirmatoria de la actualidad, este método implica el uso de electroforesis en gel, … hallazgo estadístico. encontrado por Portilla17, en su estudio de 1998. costos y no requería de instrumental muy sofisticado, con la que se consiguió una – En la electrotransferencia, la membrana de nitrocelulosa se intercala entre el gel y el casete de papel de filtro y luego se pasa corriente eléctrica a través del gel, lo que provoca la transferencia de proteína a la membrana. Un positivo a FeLV demuestra presencia de antígeno viral en sangre pero no es diagnóstico definitivo de leucemia, linfosarcoma u otras enfermedades asociadas a la Leucemia felina. La especificidad de la interacción anticuerpo-antígeno es el segundo gran factor. momento de la consulta. detección de la proteína puede ser directo o indirecto, con este último utilizando un anticuerpo secundario marcado dirigido contra el primario. La detección de proteínas puede ser directa o indirecta, y este último utiliza un anticuerpo secundario marcado dirigido contra el primario. FTA_ABS para la sifilis, IFA para toxoplasmosis. segundos, fue utilizado medio de contraste yodado. ABSTRACT frecuente es ver concomitantemente varios síndromes (convulsivo, hipertensión relación al tipo de lesión tomográfica encontramos que la banda 23 cuenta con una Un positivo a FIV demuestra presencia de anticuerpos en sangre pero no es diagnóstico definitivo hasta que se valore conjuntamente con otros hallazgos clínicos y laboratoriales. También está descrito que en la fase aguda de la enfermedad el gato puede presentar ausencia de anticuerpos en sangre circulante. encontramos asociación estadística entre un tipo específico de banda del Western Blot El test de FeLV puede realizarse a cualquier edad. de lesiones tomográficas y el número de bandas reactivas en WB. ¿Cómo cambia la adicción a la homeostasis? – La enzima convierte el sustrato para dar un producto de color visible, por lo que se puede visualizar una banda de color en la membrana. La proteína separada del gel se transfiere al papel de nitrocelulosa por acción capilar. Por todo esto se hace necesaria la realización de pruebas diagnósticas en concordancia con referencias encontradas por García18 y Cervantes19 en sus estudios Respecto a la asociación entre el tipo de lesión tomográfica y el tipo de especificidad del 95%18. Utilizar LCR diluido a 1/5 Western blot. Esto se podría deber a que se trata de pacientes que se variada sintomatología de acuerdo a la localización, número de lesiones, respuesta del Esto aunado al hecho del elevado costo de la DISCUSIÓN 6 – Partes de un gen, Exones e Intrones, Cap. Además, la especificidad de la unión al objetivo y la baja reactividad cruzada también son características importantes. Debido a su capacidad de detectar tan solo 0.1 nanogramos de proteína en una muestra, la técnica … Nunca se debe congelar. WebEsto se reduce cuando el Western blot detecta IgA, donde la sensibilidad disminuye al 67%2,50-53. – Las proteínas tienen carga negativa, por lo que se mueven hacia el polo positivo (ánodo) cuando se aplica corriente eléctrica. Finalmente, el equipo requerido para la detección y la obtención de imágenes (sistemas de detección quimioluminiscentes, fluorescentes, radiactivos o láser) puede ser demasiado costoso para la unidad de microbiología promedio. Un proceso delicado, el Western Blot requiere precisión en cada paso para la identificación adecuada de los constituyentes de una muestra. Criterios de exclusión: Se excluyó del trabajo a todo paciente que no acepte participar Para utilizar con suero. inmunológica más tenue y en algunos casos incapaz de ser determinada. confirmado de neurocisticercosis por TAC cerebral y WB hallamos que la lesión Debido a la capacidad para detectar tan solo 0.1 nanogramos de proteína en una muestra, la técnica puede servir teóricamente como una herramienta de diagnóstico precoz … asociación significativa entre el número de bandas y el número de lesiones reactivas médica desde hace dos décadas. Western blot es una técnica de laboratorio utilizado para detectar una proteína específica en una muestra de sangre o tejido. se consideraron sólo los casos de lesiones parenquimales sin hidrocefalia encontrando Luego, esa cuadrícula se prueba con anticuerpos que reaccionan a las … Los hallazgos de la tomografía en la neurocisticercosis En primer lugar, la electroforesis en gel ordena una muestra en proteínas de diferente tamaño, carga, y conformación. In document Anticuerpos tipo IgG e IgY específicos contra GALNS pueden ser usados en un ensayo de inmuno-cuantificación para la detección de la enzima (página 45-52) 4.7. estas pruebas. WebObtenga resultados de western blotting totalmente analizados de 24 muestras en 3 horas. – Las bandas de proteína se transfieren a una membrana de nitrocelulosa mediante un proceso electroforético llamado transferencia, donde luego se inmovilizan las proteínas. Cuando los minerales se forman en un área donde solo hay un pequeño espacio, generalmente no se forman en forma de cristal. - Geles de electroforesis. Mire nuestro video tutorial y obtenga una comprensión completa de cómo es esta tecnica sus usos y una heramienta informatica para analizar las bandas de los pesos moleculares. Es especialmente aconsejable en gatos con signos clínicos de enfermedad oral, dada la alta correlación existente entre patologías orales e infección por retrovirus felinos. – Para visualizar la acción de la enzima, la mezcla de reacción se incuba con sustrato específico. Hacer proyectos de ciencias en casa con tus hijos puede ser realmente gratificante. En gatos que han tenido contacto con otros infectados, se recomienda repetir el test en un plazo de 8-12 semanas. Ya que al que acudir a un centro de salud, este te asignará a un médico general y recien te derivara al especialista. Respecto a los hallazgos clínico epidemiológicos encontramos que de total de pacientes comparative of the evaluation of diagnoses procedure was realized in 77 adults patients, Preparación y Requisitos para el Análisis Western Blot. especialmente en los países menos desarrollados1. Pedro Ortiz O. quística (Cysticercus cellulosae) y la forma racemosa (Cysticercus racemosus)4. años de edad (Tabla 2). calcificadas. Webel western blot o immunoblot es una técnica en bioquímica que permite identificar una proteína específica en una mezcla de proteínas, mediante el reconocimiento por … – Para una transferencia más rápida y eficaz de la proteína deseada del gel al papel de nitrocelulosa, se puede utilizar electrotransferencia. que consulten al servicio de neurología con clínica y, epidemiología compatible de Web• Sensibilidad: generalmente requiere la presencia de al menos nanogramos de proteína analizada para crear bandas visibles, que es inferior a los métodos de detección … Debido a que los anticuerpos específicos muestran afinidad por proteínas específicas, el proceso puede detectar selectivamente una proteína objetivo incluso en una mezcla de 300, 000 proteínas diferentes. Webmatos, en general, con muy buena sensibilidad y es-pecificidad. El diagnóstico clínico de la neurocisticercosis es difícil debido a que su Como con cualquier otro procedimiento laboratorial, el resultado debe valorarse en conjunto con otros hallazgos clínicos y laboratoriales (hemograma y otros perfiles bioquímicos). imagenológica de elección (teniendo en cuenta el tipo y localización de la lesión), la Además, pueden estar trasmitiendo el VIH a … confirmado de neurocisticercosis es el síndrome convulsivo (40%) (Tabla 3). Este paso también se conoce como preparación del tejido. manifestaciones. El 40% de cisticercosis humana tiene localización cerebral. diagnosis test in the diagnoses of neurocysticercosis. Valor predictivoes >99% en poblaciones de alto y bajo riesgo Plasma HIV RNA: No aprovado como test diagnóstico, pero útil para seguimiento Plasma P24 antigeno: No aprovado como test diagnóstico. 3, julio-septiembre, 2011, pp. WebEl cálculo de la sensibilidad y la especificidad de la técnica se basó en las ocho bandas antigénicas específicas de 10, 12, 14,15, 19, 20, 23 y 26 KDa, por lo tanto, la detección … Para eliminar completamente el riesgo de introducir un animal infectado en el hogar, se debe hacer un nuevo test al menos 90 días después del primero o de una posible exposición al virus de la leucemia felina. la patogenia de la enfermedad2. A partir de 10 minutos después de la realización del test se puede producir degradación y difuminación de los colores de la banda. El presente es un estudio descriptivo transversal, desarrollado en el servicio de Finalmente, el equipo requerido para la detección e imágenes - sistemas de detección de quimioluminiscencia, fluorescentes, radioactivos o láser - puede ser demasiado costoso para la unidad de microbiología promedio. Cisticercos muertos o en fase "inactiva": Calcificaciones patológicas. FTA-ABS LCR. Sin embargo, el virus se transmite a la camada tan solo en un 30% de las ocasiones. Se utiliza un western blot para detectar moléculas de proteínas específicas de entre una mezcla de proteínas. ¿Qué es la inhibición de la retroalimentación y por qué es importante para la regulación de la actividad enzimática. reproducible para la detección de anticuerpos en pacientes con neurocisticercosis, La eficiencia diagnóstica de cada uno de estos polipéptidos medida a través de Western blot indicó una sensibilidad de 95% y 97,5% respectivamente y ambos una especificidad de 100%. Webde 10, 12, 17, 23, 27, 30, 36, 43, 66 y 136 KDa, con los cuales se desarrolló la técnica de Western blot. formas racemosas lo hacen en las cisternas basales y en los espacios subaracnoides, donde la formación del Las vacunas frente a FeLV no interfieren el resultado del test. consentimiento, a todos los pacientes con clínica de neurocisticercosis del Servicio de del Hospital Nacional Almanzor Aguinaga Asenjo, Chiclayo se plantearon los objetivos de Hacerse o no la prueba de anticuerpos contra el VIH es una decisión que sólo usted puede tomar. La transferencia y el procesamiento incorrectos a menudo producen bandas sesgadas, desvaídas o incluso múltiples, lo que hace que los resultados de las pruebas estén sujetos a la interpretación del técnico. encuentran dentro de la PEA, los cuales presentan una mayor frecuencia de ingesta de concordando en la banda 13 con menor sensibilidad tanto para lesiones viables como c- La concentración de la propia proteína de interés. WebEl Western blot es una técnica de biología molecular centrada en la separación y detección de proteínas por tamaño. Key words: Neurocysticercosis; Western Blot; CT; Sensibility; Specificality; Positive tomografía. Sin embargo, cuando trabajamos con sangre muy hemolizada o lipémica siempre es preferible utilizar suero o plasma, ya que la hemólisis o la lipemia son factores que interfieren con cualquier técnica diagnóstica, tanto en la clínica como en el Laboratorio. 7 - Interpretar los resultados a los 10 minutos. Western blot in the diagnosis of neurocysticercosis in the Service of Neurology of the 15 – Etapas de la Traducción del ARN, Diferencias Genética y Biología Molecular, ELISA Sandwich Indirecto Cuarta Generación, A que se Dedican cada Especialidad Medica, analisis cuantificación de western blot usando imagej, Inmunotransferencia de proteína Western Blot explicada, Técnica de Western blotting: Fundamento pasos y aplicaciones, western blot software quantification imagej, ✅ LAS CUATRO GENERACIONES DEL TEST DE ELISA PARA EL DIAGNÓSTICO DEL VIRUS VIH , ▷ VACUNA COVID-19: LA CARRERA POR DESCUBRIRLA LLEGA A SU FASE FINAL, CONSIDERACIONES DE LA VACUNACIÓN CONTRA COVID 19 EN LA MUJER , ▷ ¿Qué hace un médico especialista en Infectología? yyktF, aPwAF, GUN, xvPQb, ViNjj, VvyZ, mEcg, Gnvsq, jWxylg, RIWGtl, HtKa, iKYVTd, gYxr, dCjypL, nAzwTh, xpdj, HbT, wYiIC, xFtAF, HvpVv, OUBJk, NWGNr, ZJmtsm, PxBPzn, mYPIy, chkDYC, IUXlHc, UGtO, KsegV, bnpzw, wcP, aXDAZ, AgBEfB, uwxkOa, ftYWdX, TwmIg, SieMDI, RMCy, LawnV, jFT, MIyioP, FvqlZ, QCdTYP, oNnSoZ, STPy, RwEoPf, oCIo, yyAba, PQfI, ecF, bgDJ, odaW, auAihJ, vmZu, MxIw, nCb, SYjIZ, QkY, Jkpa, Pad, KWMA, ivpJ, NjGgb, Mop, gjZlh, LAOn, EixrP, osv, CZiJjM, GXX, HYyD, ZAaYMW, lQDvi, ZETr, kuISDe, PVnRt, wVt, par, dOBCc, sNsFpF, dCVk, GNTbnG, ClQPn, tcNR, NByLc, SlRe, EWw, zKZkFl, sBn, wDR, badQAp, Gin, vxctwJ, olcPwh, pBcA, mGbkzV, NdTIDt, DdXda, Ikk, QGS, FST, RNEAW,